换一批
换一批Cry1Ac基因载体构建及其在枯草芽孢杆菌中的杀虫活性表达
Construction of recombined plasmid carrying Cry 1Ac gene and expression of insecticidal activities in Bacillus subtilis
摘要根据苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis HD-73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis木糖诱导型启动子PxylR序列,分别设计2对特异引物Cry1AcF/R和PxyF/R,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板,以PxyF/Cry1AcR作引物进行重迭PCR,获得了载体PxylR-Cry1Ac,经SphⅠ和BamHⅠ完全酶切后,将PxylR-Cry1Ac插入大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,重组表达质粒pCry1Ac315转化枯草芽孢杆菌感受态细胞.工程菌株质粒酶切电泳分析、SDS-PAGE电泳分析和杀虫生物活性测定结果证实了Cry1Ac基因的导入及其在枯草芽孢杆菌JAASO1D中的有效表达.
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主题词
基因(Genes)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)质粒(Plasmids)电泳(Electrophoresis)
分类号
Q965
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:0454-6296.2005.03.005
发布时间
2005-07-07
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)（2002AA244041）；
江苏省自然科学基金（BK2003117）
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