南亚果实蝇多酚氧化酶的性质研究

Characterization of polyphenol oxidase from the fruit fly Bactrocera tau (Walker) ( Diptera: Tephritidae)

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摘要[目的]为揭示南亚果实蝇Bactrocera tau (Walker)不同发育阶段体内多酚氧化酶的活性与性质.[方法]以邻苯二酚为底物,在415 nm波长下测定了南亚果实蝇l,2和3龄幼虫、蛹以及成虫多酚氧化酶的活性和动力学参数.[结果]南亚果实蝇在不同发育阶段,多酚氧化酶的活性存在明显差异,通常3龄幼虫中活性最高,为434.42 U/mg;蛹中最低,为231.05 U/mg.在pH 6.5时,南亚果实蝇不同发育阶段多酚氧化酶的活性分别为265.42,358.34,444.42,210.02和373.99 U/mg,但当pH值高于7.0或低于5.0时,多酚氧化酶的活性则明显下降.在温度为34℃和37℃时,南亚果实蝇各发育阶段多酚氧化酶的活性均较高,当温度高于40℃或低于27℃时,活性则明显下降.以邻苯二酚为底物,2龄幼虫中多酚氧化酶的Km值(3.10 mmol/min)和Vmax(476.19 mmol/L)较大,说明多酚氧化酶对底物邻苯二酚催化能力强；蛹中多酚氧化酶的Km(0.63 mmol/min)和Vmax(50.25 mmoL/L)较小,说明多酚氧化酶对底物的亲和力和催化能力弱.当以L-DOPA为底物时,3龄幼虫中多酚氧化酶的Km值和Vmax较大,分别为0.49mmol/min和188.68mmoL/L;蛹中多酚氧化酶的Km值和Vmax较小,分别为0.25 mmol/min和21.79 mmol/L.[结论]南亚果实蝇体内多酚氧化酶在不同温度和pH值下的活性和动力学参数与虫体发育阶段密切相关.