烟夜蛾性肽受体基因的克隆与表达模式分析

Molecular cloning and expression pattern analysis of sex peptide receptor gene in Helicoverpa assulta (Lepidoptera: Noctuidae)

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摘要[目的]克隆烟夜蛾Helicoverpa assulta (Guenée)性肽受体基因并分析其表达模式,为深入研究性肽与交配后反应的关系奠定基础.[方法]采用RT-PCR方法,从烟夜蛾雌蛾性信息素腺体中得到性肽受体基因cDNA全序列.利用荧光定量PCR方法,分析该基因的表达模式.[结果]序列分析结果显示,烟夜蛾性肽受体基因cDNA全长2 048 bp,命名为HassSPR(GenBank登录号:AFH53182.1).该基因的开放阅读框长1 275 bp,编码424个氨基酸残基,序列中含有7个跨膜域结构,预测分子量和等电点分别为48.6 kDa和9.25.序列比对分析表明,HassSPR与近缘种棉铃虫H.armigera和其他蛾类性肽受体的氨基酸序列一致性分别达98.35％和超过84％,与已经报道的其他昆虫的性肽受体的氨基酸序列一致性也在64％以上.不同组织表达分析表明,HassSPR在测定的1日龄雌蛾不同组织中均有表达,以在脑中的表达量最高.时序表达分析表明,在羽化前1天至羽化后6日龄雌蛾的信息素腺体中均有表达,以3日龄表达量最高.雌蛾交配后,HassSPR在性信息素腺体和脑中的表达量显著上调,而在交配囊和卵巢中的表达量显著下调.[结论]从烟夜蛾雌蛾性信息素腺体中克隆得到性肽受体基因HassSPR,其表达模式提示该基因的表达水平与雌蛾的生殖生理和生殖行为有关.