换一批
换一批家蚕Caspase家族基因BmCaspase-X的克隆与功能分析
Cloning and functional analysis of a Caspase gene BmCaspase-X in Bombyx mori
摘要[目的]本研究旨在克隆获得家蚕Bombyx mori Caspase家族基因,并通过RNAi技术初步分析其在家蚕细胞水平细胞凋亡中的功能.[方法]用cDNA末端快速扩增方法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆家蚕Caspase家族一个新基因,用RNAi和流式细胞术初步分析该基因在家蚕细胞凋亡中的功能.[结果]将克隆获得的家蚕Caspase家族基因命名为BmCaspase-X,其全长为2 105 bp,开放阅读框长为1 494 bp,编码497 aa,分子量为57.8 kDa,等电点为5.29.BmCaspase-X含有Caspase特有的结构位点.系统进化分析表明,BmCaspase-X与家蚕ICE同其他昆虫Caspase-4同源物先聚在一起,再与具有长前体结构域的昆虫其他因子聚为一类.RNAi初步结果显示该基因干扰后没有出现明显的细胞凋亡.[结论]BmCaspase-X具有典型Caspase特征,属于Caspase家族成员.目前RNAi实验结果表明BmCaspase-X未能引起家蚕细胞凋亡的改变.本文为进一步研究该基因的功能奠定基础.
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