绿盲蝽气味受体基因AlucOR40的克隆及功能研究

Cloning and characterization of an odorant receptor gene AlucOR40 in Apolygus lucorum (Hemiptera: Miridae)

导出 LinkOut 学术成果认领

摘要[目的]从绿盲蝽Apolygus lucorum触角中克隆气味受体基因AlucOR40,研究该气味受体基因在绿盲蝽不同组织中的表达水平,然后对该基因的功能进行研究,为理解绿盲蝽的嗅觉识别机制提供理论基础.[方法]在绿盲蝽成虫触角转录组测序与分析的基础上,通过PCR技术克隆得到气味受体基因AlucOR40的全长序列.用半定量RT-PCR研究该基因在雌雄虫不同组织中的表达水平.然后通过爪蟾卵母细胞体外表达该基因,并结合双电极电压钳检测了该气味受体对60种气味分子包括绿盲蝽性信息素组分和植物挥发物的反应.然后,利用触角电位技术测定羽化后3d的绿盲蝽成虫对AlucOR40的气味配体的触角电位反应.[结果]克隆了AlucOR40(GenBank登录号:KU886190).AlucOR40编码398个氨基酸,蛋白具有7个跨膜结构域,N末端位于胞内,C端位于细胞外,符合昆虫气味受体的典型特征.半定量RT-PCR的结果显示,AlucOR40在触角中特异表达,且在雄虫触角中的表达水平高于雌虫.双电极电压钳记录结果显示,AlucOR40只对反-2-己烯醇一种气味分子具有特异反应.EAG实验结果表明,羽化后3d的绿盲蝽雌雄虫都对反-2-己烯醇有反应,且雄虫触角的EAG反应显著高于雌虫.[结论]结果提示AlucOR40参与了绿盲蝽对反-2-己烯醇的识别过程,推测其在绿盲蝽交配过程中雄虫对雌虫的识别中发挥作用.