巨疖蝙蛾不同虫态的COI基因条形码识别

DNA barcoding of various developmental stages of Endoclita davidi (Lepidoptera: Hepialidae) based on mtDNA COI gene sequence

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摘要[目的]巨疖蝙蛾Endoclita davidi(Poujade,1886)是雪峰虫草菌Ophiocordyceps xuefengensis的重要寄主.本研究分析了该虫线粒体DNA COI基因条形码,以在不同虫态及被虫草菌寄生的僵虫状态下能快速准确鉴定寄主种类.[方法]PCR扩增巨疖蝙蛾成虫(足一对,胸肌,翅基部)、卵(单粒)、幼虫(胸足一对)、蛹(少量体壁组织)及虫草僵虫(胸足或体壁)组织共计21个样品的COI基因片段(约658 bp)并进行测序和比对;以MEGA6.0软件的K2-P双参数模型计算种内及种间遗传距离;以邻接法(neighbor-joining,NJ)和最大简约法(maximum parsimony,MP)两种方法构建系统发育树.[结果]聚类分析与形态学鉴定结果一致,所纳入分析的20个样品均为同一物种,节点支持率可达99％.种内遗传距离为0.00％～ 1.08％,平均0.54％.与蝙蝠蛾科其他6种昆虫种间遗传距离为5.36％～13.31％,平均10.47％;种间遗传距离为种内遗传距离的19.39倍(10.47％vs0.54％),而且种内与种间遗传距离没有重叠区域.[结论]基于mtDNA COI基因DNA条形码技术可以用于巨疖蝙蛾的快速准确鉴定,并对蝙蝠蛾科(Hepialidae)昆虫的分子系统发育分析有重要意义.