脂动激素对桔小实蝇幼虫生长发育的调控作用
Regulation of adipokinetic hormone on the growth and development of the Bactrocera dorsalis(Diptera:Tephritidae)larva
摘要[目的]脂动激素(adipokinetic hormone,AKH)是一种对昆虫正常生命活动发挥重要调控作用的神经肽,通过解析脂动激素对桔小实蝇Boctrocera dorsalis幼虫生长发育的调控作用,有助于加深对昆虫神经肽保守性及功能多样性的认识,同时也为评估AKH信号系统作为新型控制剂靶标潜力提供基础依据.[方法]克隆桔小实蝇AKH基因BdAKH的cDNA全长序列,利用生物信息学方法分析其序列特征;采用qPCR技术检测BdAKH在桔小实蝇不同发育阶段(卵、1-3龄幼虫、蛹以及未交配雌成虫和雄成虫)和桔小实蝇3龄末期幼虫不同组织(中枢神经系统、心侧体/咽侧体(corpora cardiaca/corpus allatum,CC/CA)、脂肪体、马氏管、中肠、后肠、表皮、卵巢、精巢以及血淋巴)中的表达量;运用免疫组化技术定位桔小实蝇3龄幼虫中表达BdAKH的神经元;通过RNAi结合生物学观察分析BdAKH对桔小实蝇幼虫生长发育的调控作用.[结果]克隆获得桔小实蝇BdAKH(GenBank登录号:KY073319)cDNA全长序列,长572 bp,开放阅读框长252 bp,编码83个氨基酸残基.桔小实蝇BdAKH结构相对保守,包含一个成熟肽序列QLTFSPDWamide;BdAKH基因在桔小实蝇成虫中表达量较高,并且主要在3龄末期幼虫CC/CA表达;敲低3龄幼虫BdAKH后导致桔小实蝇化蛹时间和化蛹率较对照组(dsGFP)分别延迟和降低,但蛹重及蛹型较对照组之间无明显差异.[结论]AKH对桔小实蝇幼虫生长发育过程具有重要调控作用,表明其具备作为害虫控制剂靶标的潜力.
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