换一批绿豆象气味结合蛋白CchiOBP3与绿豆挥发物的结合特性分析
Binding characterization of odorant-binding protein CchiOBP3 of Callosobruchus chinensis(Coleoptera:Bruchidae)to Vigna radiata volatiles
摘要[目的]通过分析绿豆象Callosobruchus chinensis气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)CchiOBP3与绿豆Vigna radiata挥发物配体的结合特性,研究CchiOBP3在绿豆象嗅觉识别中的功能,为阐明绿豆象定位寄主的嗅觉识别机理提供理论依据.[方法]采用SWISS-MODLE软件对绿豆象CchiOBP3进行同源建模,采用SAVES 6.0软件对模型进行评估,并采用Autodock 4.2.6软件对CchiOBP3与26种绿豆挥发物配体进行分子对接模拟;通过原核表达和亲和柱层析获得CchiOBP3重组蛋白,运用荧光竞争结合实验验证CchiOBP3重组蛋白与4种高结合能绿豆挥发物配体的结合特性,并通过触角电位(electroantennogram,EAG)实验检测绿豆象雌成虫对4种挥发物配体的反应.[结果]CchiOBP3与26种配体中的17种配体形成了氢键,氢键位置主要在第112位的苯丙氨酸(phenylalanine);筛选出与CchiOBP3结合能较高的4种配体反式石竹烯、4-萜烯醇、环已基苯和2-甲基萘,CchiOBP3与其中的4-萜烯醇(Ki=7.16 μmol/L)、环己基苯(Ki=7.45 μmol/L)和2-甲基萘(Ki=13.97 μmol/L)具有较强的结合能力.此外,4种挥发物配体均能引起绿豆象雌成虫的EAG反应,且4-萜烯醇引起的反应最强.[结论]CchiOBP3可与3种绿豆挥发物配体结合,推测CchiOBP3在绿豆象定位寄主的过程中发挥着重要作用.
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关键词
绿豆象CchiOBP3分子对接原核表达荧光竞争结合EAGCallosobruchus chinensisCchiOBP3molecular dockingprokaryotic expressionfluorescence competitive bindingEAG
分类号
Q965（昆虫生理学）
栏目名称
DOI
10.16380/j.kcxb.2023.05.006
发布时间
2023-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2021YFD1600603-01）
现代农业产业技术体系（CARS-08-G10）
山西省自然科学基金（20210302124166）
山西省现代农业产业技术体系建设（2023CYJSTX03-29）
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