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沉默HvFer1影响茄二十八星瓢虫的发育和肠道稳态

Silencing of HvFer1 affects the development and gut homeostasis of the 28-spotted ladybeetle,Henosepilachna vigintioctopunctata(Coleoptera:Coccinellidae)

摘要[目的]本研究旨在探究茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata中的重链铁蛋白(ferritin 1 HCH,Fer1)基因HvFer1功能,为茄二十八星瓢虫生物防治提供理论基础.[方法]对HvFer1氨基酸序列进行blastp分析后,再与不同物种的Fer1序列进行多重比对;通过RT-qPCR检测HvFer1在茄二十八星瓢虫不同发育阶段(卵、1-4龄幼虫、蛹和雌雄成虫)和4龄幼虫不同组织(头、中肠、脂肪体、表皮和马氏管)中的表达量;通过注射200 ng/头的dsHvFer1沉默茄二十八星瓢虫3龄幼虫HvFer1,观测幼虫表型、存活率和4龄幼虫至蛹的历期以及中肠中双氧化酶(dual oxidase,Duox)基因 HvDuox 表达量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及细菌多样性.[结果]鞘翅目(Coleoptera)昆虫的Fer1序列聚为一支,HvFer1与异色瓢虫 Harmonia axyridis 和七星瓢虫 Coccinella septempunctata 的 Fer1 亲缘关系最近.HvFer1在茄二十八星瓢虫雄成虫中的表达量最高,在4龄幼虫中的表达量最低;HvFer1在4龄幼虫中肠中的表达量显著高于其他组织中的.与对照组(注射dsGFP)相比,对茄二十八星瓢虫3龄幼虫注射dsHvFer1(200 ng/头)后4龄幼虫到蛹的历期显著延长,蛹的部分枝刺和斑点无法正常形成;羽化后的成虫鞘翅发育异常,斑点融合或者缺失;3龄幼虫HvFer1的表达量在注射dsHvFer1第2天时与对照组比无显著差异,在注射dsHvFer1第4天时与对照组比显著降低.HvFer1的沉默导致茄二十八星瓢虫幼虫体内发生剧烈的氧化应激,中肠中HvDuox的表达量、ROS水平和MDA含量与对照组比显著上调,改变了中肠细菌的结构组成,降低了肠杆菌属Enterobacter和金黄杆菌属Chryseobacterium的相对丰度,提高了沙雷氏菌属Serratia、假单胞菌属Pseudomonas和不动杆菌属Acinetobacter等肠道菌的相对丰度.[结论]HvFer1在调控茄二十八星瓢虫幼虫发育、成虫表型、维持幼虫肠道免疫和微生物稳态过程中起着至关重要的作用,有望成为基于RNAi技术防治茄二十八星瓢虫的候选靶标基因.

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昆虫学报

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2025年68卷6期

709-719页

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