外源保幼激素对草地贪夜蛾雌虫卵巢发育及生殖关键基因转录水平的影响
Effects of exogenous juvenile hormone on the female ovarian development and transcription levels of the reproduction-key genes in Spodoptera frugiperda(Lepidoptera:Noctuidae)
摘要[目的]本研究旨在探究外源保幼激素(juvenile hormone,JH)对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda雌虫卵巢发育及生殖关键基因转录水平的影响.[方法]分离纯化获得草地贪夜蛾雌虫卵黄蛋白,制备多克隆抗体;通过间接酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定卵黄蛋白在草地贪夜蛾7-8日龄雌蛹和1-10日龄雌成虫脂肪体和卵巢中的含量.使用25 μg/头早熟素处理5日龄雌蛹,取初羽化雌成虫外源补充100 μg/头JH类似物烯虫酯,随后统计产卵前期、产卵期、单雌产卵量以及孵化率;对3日龄雌成虫进行解剖,观察卵巢发育情况测量卵巢长度并拍照.利用qPCR测定各处理雌成虫卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)及卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor,VgR)基因的表达量.[结果]草地贪夜蛾卵黄蛋白含量随着雌成虫羽化呈现先升高后降低的动态变化,在1日龄时脂肪体中达到高峰,在4日龄时卵巢达到高峰.早熟素处理下调草地贪夜蛾内源JH后卵巢发育较正常饲养的雌成虫空白对照组明显受阻,卵巢抱卵量显著减少,而早熟素处理后外源补充烯虫酯使卵巢基本恢复正常发育.早熟素处理组卵巢平均长度为39.89 mm,较空白对照组的49.79 mm显著缩短;烯虫酯处理组卵巢平均长度为46.67 mm,显著长于早熟素处理组,并与空白对照组没有显著差异.早熟素处理组平均单雌产卵量较空白对照组的1 128.37粒下降至576.33粒,显著下降了 48.91%,烯虫酯处理组平均单雌产卵量为806.93粒,显著高于早熟素处理组的.早熟素处理组雌成虫SfVg和SfVgR的表达量与空白对照组相比显著下调,烯虫酯显著促进了SfVg和SfVgR的表达量.[结论]早熟素处理下调草地贪夜蛾内源JH显著干扰了雌虫生殖力,阻碍了卵巢正常发育以及雌成虫SfVg和SfVgR的转录水平,而外源补充JH使雌虫生殖力明显得到了恢复.本研究进一步证实了 JH在草地贪夜蛾生殖过程中具有重要调控作用,为后续研究JH调控雌虫生殖的分子机制提供了理论依据.
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