双叉犀金龟肠道纤维素降解菌复合菌系的构建、产纤维素酶条件优化及菌糠降解能力评价
Optimization of cellulase production conditions of composite bacterial consortia constructed with the gut-derived cellulose-degrading bacteria from Allomyrina dichotomus(Coleoptera:Scarabaeidae)and assessment of their degradation efficiency for spent mushroom substrate
摘要[目的]筛选双叉犀金龟Allomyrina dichotomus肠道纤维素降解菌株构建复合菌系,研究其菌糠降解能力,为废弃菌糠的处理提供理论基础和实践依据.[方法]利用双叉犀金龟幼虫肠道分离纯化得到的6株较高酶活力的纤维素降解细菌(贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis M24,枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis H12,H11,H4 和 M33 及暹罗芽孢杆菌 Bacillus siamensis M32),以互不拮抗为前提构建复合菌系,测定其4种纤维素酶(滤纸酶、内切葡聚糖苷酶、外切葡聚糖苷酶和β-葡萄糖苷酶)活力,依据酶活力谱选定最优复合菌系,对复合菌系的培养时间、接种量和培养温度进行优化,并通过差重法对降解前后菌糠结构变化进行扫描电子显微镜观察.[结果]基于滤纸酶、内切葡聚糖苷酶、外切葡聚糖苷酶和β-葡萄糖苷酶的活力(分别为18.08,69.37,19.09和17.95 U/mL),构建复合菌系M24:H11;M24:H11最佳培养时间2 d、接菌量1%和培养温度40 ℃,优化后4种纤维素酶活力显著提升1.98~2.16倍;25 ℃下30 d内,M24:H11和单菌株菌糠降解率随时间均呈显著上升趋势,M24:H11菌糠降解率显著高于单菌株,最高可达38.04%;M24:H11的降解处理有效地打开了菌糠表面结构,接触面积增大.[结论]本研究构建了双叉犀金龟幼虫肠道来源的复合菌系M24:H11,对其进行产酶条件优化.M24:H11可有效降解菌糠,为食用菌废弃物的高效处理提供了新的技术思路和理论依据.
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