换一批
换一批利用正交设计优化异色瓢虫SRAP-PCR反应体系
Optimization of SRAP-PCR reaction system for Harmonia axyridis using orthogonal design
摘要利用正交设计L16(45)对异色瓢虫Harmonia axyridis(Pallas)SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物)在4个水平上进行优化试验,试验结果用DPS和MINITAB软件进行分析,建立了异色瓢虫SRAP-PCR反应的最佳体系,即在20 μL体系中模板50～100 ng、引物0.25μmol/L、dNTPs 0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5U、Mg2+ 0.375～0.625 mmol/L.并对反应体系进行梯度退火试验,得到最佳退火温度为50.3℃.这一优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行瓢虫遗传图谱的构建、多态性分析和基因定位奠定了技术基础.
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