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绿僵菌素对四种昆虫细胞的毒性

Toxicity of destruxins to four insect cell lines

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摘要【目的】绿僵菌素（Destruxins）是绿僵菌产生的具有杀虫活性的次生代谢产物，本研究以家蚕Bombyx mori Bm12细胞、亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis血细胞（Ofh）、果蝇S2细胞和草地贪夜蛾Sf9细胞为对象，探索绿僵菌素对不同昆虫细胞的毒性差异。【方法】采用MTT法和显微观察法比较绿僵菌素A、B（DA、DB）以及两者等量混合物（DABM）对上述4种昆虫细胞的影响，比较其IC50值和形态学变化。【结果】绿僵菌素处理24 h后，在较低处理剂量（<25μg /mL）下，Ofh细胞比Bm12、S2、Sf9细胞对DA、DB和DABM更为敏感，DA、DB和DABM对Ofh细胞IC50值分别219.19、112.29和34.86μg/mL，而对Bm12、S2、Sf9细胞的IC50值均大于250μg/mL；DA和DB对Ofh细胞具有协同增效作用，对Sf9细胞具拮抗作用，对Bm12和S2细胞具相加作用。显微观察发现，绿僵菌素处理后，6.25μg/mL的低剂量下，即可发现细胞的形态变化，剂量越高，变化越显著。Bm12细胞出现瘤状突起、细胞破碎、聚集、扩展及胞内空泡等现象，且细胞数量减少；Ofh细胞扩展，似乎回归到浆血细胞及类绛色细胞的形态，发生凝集现象，少数出现瘤状突起和细胞破碎；S2细胞出现明显的胞内空泡，少数发生扩展、破碎和聚集现象；Sf9细胞细胞膜收缩、细胞空泡、破碎，细胞数量减少等变化。【结论】玉米螟的血细胞Ofh对绿僵菌素最为敏感，而来自非寄主昆虫果蝇的S2细胞最不敏感。绿僵菌素对4种细胞的致死剂量较高，但引起细胞形态改变的剂量却非常低。