换一批干扰CXCR4基因抑制胰腺癌经典Wnt通路活化的体外实验研究
Inhibition of Canonical Wnt Signaling Pathway in Pancreatic Cancer by Interfering CXCR4 in Vitro
摘要目的 观察CXCR4 shRNA转染胰腺癌细胞后经典Wnt通路的活性变化.方法 构建CXCR4 shRNA 表达载体转染胰腺癌CXCR4高表达细胞Miapaca-2并应用G418筛选出稳定表达株,通过Realtime-PCR、Western Blot实验观察RNAi对CXCR4基因的抑制效率；通过PGL3-OT/OF荧光素酶检测方法观察CXCR4基因沉默后对胰腺癌Wnt/β-catenin经典通路活性的影响,并通过Realtime-PCR、Western Blot实验观察CXCR4shRNA对Wnt/β-catenin通路下游靶基因的影响.结果 特异性CXCR4基因沉默能够在基因和蛋白水平稳定、高效、特异地抑制CXCR4的表达,抑制效率达70％以上,同时,特异性CXCR4干扰后能够显著抑制PGL3-OT转染后的荧光素活性(P＜0.05)以及Wnt/β-catenin下游靶基因的mRNA及蛋白的表达.结论 CXCR4基因沉默能抑制Wnt/β -catenin经典通路在胰腺癌中的活性,阻遏Wnt/β -catenin通路下游靶基因表达,为CXCR4作为胰腺癌治疗的分子靶点提供依据.
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分类号
R735.9
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1003-4706.2011.11.004
发布时间
2012-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学青年基金资助项目（81172195;30700817）
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