换一批抗菌肽LL-37对尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的作用
Effect of Cathelicidin LL-37 on Transmembrane Barrier Function of Urothelial Cells
摘要目的 探索LL-37对膀胱尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的具体作用,构建适于体外研究间质性膀胱炎(interstitial cystitis,IC)的细胞实验模型.方法 分别用不同浓度的LL-37处理人尿路上皮永生化细胞SV-HUC-1,通过跨上皮电阻测量仪测量跨上皮细胞电阻,CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期和钙离子浓度,RT-qPCR和WB检测葡萄糖胺聚糖(GAGs)关键成分硫酸乙酰肝素的表达水平.结果 体外细胞跨上皮电阻测量显示,100和200μg/mL LL-37可显著抑制细胞的跨上皮电阻,破坏SV-HUC-1细胞的跨膜屏障功能.CCK-8和PI染色流式细胞检测显示,100 μg/mL以上的LL-37可显著降低SV-HUC-1细胞的增殖活力,提高SV-HUC-1细胞处于G0/G1期的比例(P＜0.05),提示细胞增值受到显著抑制.进一步流式细胞术检测SV-HUC-1细胞中的钙离子浓度显示,LL-37处理后的尿路上皮细胞内钙离子浓度显著升高(P＜0.05),且增高量与LL-37浓度相关.RT-qPCR和WB检测证实经LL-37处理后SV-HUC-1细胞的GAGs关键成分硫酸乙酰肝素表达显著上调(P＜0.05).结论 抗菌肽LL-37可抑制SV-HUC-1细胞内GAGs关键成分硫酸乙酰肝素的表达,并破坏SV-HUC-1的细胞增殖和跨膜屏障功能.
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DOI
10.12259/j.issn.2095-610X.S20220806
发布时间
2022-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（82160150）
云南省科技厅-昆明医科大学应用基础联合专项青年博士基金资助项目（2019FE0001-149）
云南省科技厅-昆明医科大学联合专项基金资助项目（202001AY070001-062）
云南省医学学科后备人才培养基金资助项目（H-2017045）
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