伯氏疏螺旋体在HMC3细胞感染模型中WDR36和WRN基因的表达分析
Expression Analysis of WDR36 and WRN Genes of Borrelia Burgdorferi in HMC3 Cell Line Infection Model
摘要目的 为探索神经莱姆病的分子机制,通过转录组学与伯氏疏螺旋体感染发现相关的 2 个基因WDR36和 WRN,以证明其具有靶点治疗的潜力.方法 通过建立非人灵长类动物模型,利用高通量测序技术获取转录组学数据.通过GO富集分析,识别出 2 个具有研究价值的WDR36和WRN差异表达基因.为进一步验证这 2 个基因在Bb感染神经莱姆病中的作用,采用人脑胶质细胞HMC3 细胞株作为模型.实验组细胞接受了不同MOI(1 和 10)的Bb接种,并在感染后 6 h、12 h和 24 h收集细胞悬液.使用trizol法提取RNA,并通过qPCR法测定WDR36和WRN基因的mRNA相对表达水平.结果 在Bb感染的HMC3 细胞中,发现Bb MOI=1为适宜感染浓度.结果 表明WDR36的表达量在 24 h与 12 h对比有显著的上调(P<0.01),且 6 h的PBS组与试验组基因表达含量对比上升但不明显(P>0.05),12 h、24 h上升明显,差异有统计学意义(P<0.01),WRN的表达量在 24 h与 12 h对比有显著上调,且 6 h、12 h、24 h的实验组分别比其PBS组基因表达含量呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.01).结论 WDR36和WRN的上调可能与LNB的神经病理过程相关,这些发现为进一步研究LNB的分子机制提供了新的视角,并可能为开发针对Bb感染的新型治疗方案提供潜在的分子靶点.
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