促红细胞生成素促进骨髓基质细胞成骨分化的实验研究

Erithropoitin Mediated Osteoblast Differentiation is Related by EphrinB2/EphB4 Signaling

二维码有效期 120s

摘要目的:研究促红细胞生成素(EPO)通过ephrinB2/EphB4信号通路在细胞成骨分化中的作用.探讨EPO在骨稳态中的作用及其机制.方法:体外培养小鼠骨髓基质细胞系(ST2),加入EPO后,采用real-time PCR方法检测EphB4的表达以及成骨细胞相关基因的表达,采用ALP活性检测和茜素红染色观察EPO对成骨细胞功能的影响;在体外培养的ST2细胞中加入ephrinB2-Fc蛋白,模拟破骨细胞-成骨细胞共培养,使ephrinB-EphB4正向信号激活,采用上述方法检测其对成骨细胞的影响;进一步采用RNAi技术,使EphB4基因沉默,检测EPO对成骨细胞的影响.结果:EPO能增加ST2细胞RUNX2 、ALP和Col1等成骨细胞相关基因的表达,同时伴随ST2细胞表面EphB4的表达升高,ALP活性和钙结节也增加;在模拟破骨细胞-成骨细胞共培养体系中,EPO也能促进ST2细胞的成骨向分化和功能;EphB4基因沉默后,EPO对ST2细胞的作用被减弱.结论:EPO能促进成骨细胞的分化和功能,该作用是通过ephrinB2/EphB4信号介导的.