CXCL2-CXCR2轴在血管内皮细胞趋化循环纤维细胞过程中的作用研究
The role of CXCL2-CXCR2 axis in chemotaxis of circulating fibrocytes by vascular endothelial cells
摘要目的:探讨人CXC趋化因子配体2[chemokine(C-X-C motif)ligand 2,CXCL2]及其受体CXC趋化因子受体2[chemokine(C-X-C)receptor 2,CXCR2],即CXCL2-CXCR2轴,在血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)趋化循环纤维细胞(circulating fibrocytes,CFs)中的作用.方法:将人CFs与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein en-dothelial cells,HUVECs)在Transwell小室内共培养;用基因芯片技术检测共培养后上调的趋化因子,并筛选出CXCL2、CC趋化因子配体23[chemokine(C-C motif)ligand 23,CCL23]、CXC趋化因子配体16[chemokine(C-X-C motif)ligand 16,CXCL16]3种趋化因子;然后利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、蛋白质印迹法(Western blotting)进一步筛选共培养后上调的趋化因子及其受体;最后采用趋化因子及趋化因子受体阻断实验明确在VECs趋化循环纤维细胞过程中起作用的趋化因子及其受体.结果:HUVECs与CFs共培养后,CCL23的mRNA表达水平上调;CXCL2的mRNA表达水平及蛋白表达水平均发生了显著上调.同时,CXCR2的mRNA表达水平及蛋白表达水平也发生了显著上调.趋化因子阻断实验表明,在2种细胞的Transwell共培养体系内分别添加CXCL2及CXCR2的多克隆抗体后,发生迁移的人CFs数量明显减少.结论:CXCL2-CXCR2轴可能在VECs趋化CFs的过程中起一定的正向调节作用.
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