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基底硬度调节成骨细胞体外生长及分化

The effect of stiffness of matrix on the osteoblasts growth and differentiation

摘要目的:研究不同硬度的聚丙烯酰胺(PA)水凝胶基底对人成骨细胞系MG63生长及分化的影响.方法:制备不同硬度的PA水凝胶,检测其吸水膨胀、润湿性、弹性模量等性能;将MG63细胞接种在包被有Sulfo-SANPAH和Ⅰ型胶原蛋白的不同硬度PA水凝胶表面,光镜和扫描电镜观察细胞生长情况,实时定量RT-PCR和细胞免疫荧光染色检测成骨相关和细胞干性相关基因和蛋白的表达.结果:制备出硬度分别为(31.32±1.04)kPa和(147.62±1.30)kPa的PA水凝胶(PA1和PA2),均具有良好的亲水性能.细胞在PA水凝胶上呈团块生长.相比于传统培养皿,PA水凝胶上培养的细胞性别决定相关基因簇2(SOX2)、八聚体结合转录因子4(OCT4)基因和蛋白表达显著升高(P<0.05),Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)基因和蛋白表达显著降低(P<0.05);在PA1、PA2上生长的细胞成骨相关基因表达无明显差异(P>0.05),PA2组细胞OCT4及SOX2基因表达高于PA1(P<0.05).结论:较高硬度的PA水凝胶有利于成骨细胞生长和维持细胞干性.

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