摘要目的 观察慢性束缚应激后,小鼠清醒状态下咬肌肌电水平以及支配咬肌运动的三叉神经运动核(trigeminal motor nucleus,Vmo)神经元的变化,为探究心理因素与颞下颌关节紊乱病发生的相关中枢调控机制提供实验依据.方法 32 只雄性小鼠被随机分为对照组、应激组,对应激组小鼠施加 4h/d、连续 14d的慢性束缚应激;对照组小鼠正常饲养.14 d后,通过旷场实验与高架十字迷宫实验观察小鼠的行为学改变;检测清醒状态下小鼠咬肌肌电水平;采用全细胞膜片钳技术观察Vmo神经元的电生理特性,并利用免疫组织荧光技术观察Vmo内Ⅰ型、Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体(vesicular glutamate transporter 1/2,VGLUT1/2)的表达情况.结果 应激组小鼠在旷场实验的中央活动时间(P=0.0004)与中央活动路程(P=0.0004)均显著低于对照组;高架十字迷宫实验中应激组小鼠的开臂进入次数百分比(P=0.0002)与滞留开臂时间百分比(P=0.0013)均显著低于对照组,显示存在明显的焦虑样行为.对照组和应激组小鼠在应激开始前,咬肌累积肌电(integral electromyography,iEMG)(P=0.8779)及振幅均方根(root mean square,RMS)(P＞0.9999)均无明显差异;应激结束后,应激组小鼠咬肌的iEMG(P=0.0004)和 RMS 值(P= 0.0001)均显著高于对照组.对照组小鼠在应激前后的 iEMG(P= 0.7989)和 RMS 值(P＞0.9999)比较无显著差异;应激组小鼠在应激结束后,其咬肌的iEMG(P=0.0011)和RMS值(P=0.0019)显著高于应激前水平.电生理结果显示,在电流钳模式下,当输入 60、80、100 pA电流时,应激组小鼠Vmo神经元的放电频率显著高于对照组(P＜0.05);应激组小鼠Vmo神经元的自发性兴奋性突触后电流频率(P=0.0030)与幅度(P=0.0002)显著高于对照组.免疫组织荧光染色结果显示,应激组小鼠Vmo部位的VGLUT1(P=0.0010)与VGLUT2 荧光强度(P=0.0013)均显著高于对照组.结论 慢性束缚应激能够导致小鼠的焦虑样行为及咬肌肌电活动水平的增高.应激后脑内Vmo神经元兴奋性升高,其受到的谷氨酸能兴奋性投射增多,可能是束缚应激造成咬肌肌电活动水平升高的中枢机制之一.