PAD4在颌骨生长发育调控中的作用初探
Preliminary study on the role of peptidyl arginine deiminase 4 in the regulation of maxillofacial development
摘要目的 探究肽基精氨酸脱亚氨酶4(peptidyl arginine deiminase 4,PAD4)对颌骨间充质干细胞(mesenchymal stem cells isolated from oral bones,OMSC)分化及颅颌面发育的影响.方法 通过免疫荧光技术检测PAD4在胚胎发育期小鼠颌骨中的表达,构建PAD4基因敲除(PAD4-KO)小鼠模型,通过micro CT比较PAD4-KO小鼠与野生型小鼠颌骨发育差异;通过CCK-8、Transwell等实验测定PAD4-KO与野生型(wild type,WT)小鼠OMSC增殖及迁移能力的差异,通过ALP实验测定了两组小鼠OMSC的成骨能力,并通过免疫荧光、PCR测定成骨相关基因的表达差异.结果 PAD4在小鼠E13.5期胚胎颌骨组织中表达,细胞水平上PAD4在OMSC细胞核及线粒体中表达.观察见PAD4-KO小鼠下颌骨发育迟缓,micro CT示PAD4-KO小鼠颅骨及颌骨发育迟缓、矿化不良.细胞实验示PAD4-KO小鼠OMSC细胞增殖及迁移能力下降,ALP实验结果示OMSC成骨矿化能力下降,免疫荧光和PCR结果示成骨相关基因表达水平降低.此外研究发现PAD4可能通过调节Runx2的转录影响OMSC的矿化.结论 PAD4在胚胎发育期颌骨中表达,其可能通过调节OMSC的分化功能,从而影响胚胎发育,导致颅颌面发育异常.
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