换一批
换一批LE-pGJA-P/VAX黏膜递呈系统的制备及其理化性质评价
Preparation and Characterization of LE- pGJA- P/VAX as a Mucosal Delivery System
摘要目的:制备LE- pGJA- P/VAX黏膜递呈系统,并对其理化和生物学性质进行检测.方法:利用中试生产的pGJA- P/VAX质粒通过与脂质体LE溶液直接混合制备LE- pGJA- P/VAX复合物,通过琼脂糖凝胶电泳阻滞实验和激光粒度仪检测该复合物的理化性质,并将其体外转染CHO细胞检测是否能体外表达目的蛋白.结果:制备的LE- pGJA- P/VAX复合物平均粒径为50 nm,ZETA电位为14.5 mV,体外转染CHO细胞48 h后,经细胞免疫荧光染色,转染组可见细胞浆红色荧光染色,提示可有效表达质粒编码的PAc蛋白,而裸质粒转染组则未见明显红色荧光.结论:LE- pGJA- P/VAX复合物表面电荷均匀,粒径小,且粒径分布范围窄,符合纳米粒子特征,可在体外表达编码蛋白,提示该递呈系统可用于防龋DNA疫苗的黏膜递呈,为后续增强防龋DNA疫苗经鼻腔黏膜途径投递的免疫效能奠定基础.
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