换一批
换一批变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建
Construction of Streptococcus Mutans Fluoride-resistant Strain with GtfB Gene Inactive
摘要目的:构建变形链球菌 (S.mutans) 耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株, 为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础.方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段, 以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反应法 (overlap extension polymerase chain reaction, OE-PCR) 获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后, 进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株, 并进行PCR鉴定.结果:经PCR鉴定和测序鉴定, 含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定, UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功.结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株, 可用于gtfB基因功能的研究.
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关键词
变形链球菌耐氟菌株gtfB基因重叠延伸聚合酶链反应同源重组基因失活Fluoride-resistant streptococcus mutansGtfB geneOverlap extension polymerase chain reactionHomologous recombinationGene inactivation
主题词
基因沉默(Gene Silencing)氟(Fluorine)先天畸形(Congenital Abnormalities)基因(Genes)聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)
栏目名称
口腔微生物学研究
DOI
10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.05.008
发布时间
2018-08-30
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