慢病毒介导的αB-晶状体蛋白基因沉默对胃癌细胞SGC-7901增殖和迁移能力的影响
Effects of silencing CRYAB mediated by lentivirus on the proliferation and migration of human gastric cancer cell line SGC-7901
摘要目的 应用慢病毒转染技术研究αB-晶状体蛋白(CRYAB)基因沉默对人胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移能力的影响.方法 构建CRYAB慢病毒载体转染人胃癌细胞株SGC-7901,获得稳定转染的细胞株,制备空载体作为阴性对照组(sh-ctrl组),实验组为CRYAB病毒转染组(sh-CRYAB组).提取总RNA和蛋白,应用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测CRYAB的表达,应用CCK-8、Transwell和细胞划痕实验分别检测CRYAB基因沉默后细胞增殖和迁移能力的变化.结果 慢病毒转染SGC-7901细胞后,CRYAB mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.01,P<0.001),表明成功构建了稳定转染的CRYAB-shRNA胃癌细胞株.与sh-ctrl组比较,sh-CRYAB组细胞的增殖能力在第4天、第5天显著降低(P< 0.05,P<0.01),sh-CRYAB组细胞迁移率显著降低(P<0.01).结论 CRYAB表达沉默可降低胃癌细胞的增殖和迁移能力,CRYAB有望成为胃癌基因治疗的新靶点.
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