核酸酶NucB高效表达工程菌株的构建及功能测定

Construction and functional evaluation of an engineered bacte-rial strain for high-efficiency expression of NucB nuclease

二维码有效期 120s

摘要目的构建可以高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株.方法以大肠杆菌DH5α(DE3)为材料,采用基因编辑的方法将其中的必需基因lexA敲除,重新设计一个带有lexA基因的质粒进行基因回补,从而得到工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA,再将带有目的基因nucB的质粒转入基因改造后的菌株中发酵培养生产核酸酶NucB并测定功能.结果经过基因改造后的大肠杆菌DH5α(DE3)ΔlexA与未经基因改造的大肠杆菌对比显示:改造后的菌株质粒非常稳定,蛋白表达量高且发酵过程中可以不用添加抗生素来生产核酸酶NucB.结论以基因编辑的方法成功构建一株无抗生素、高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA.

作者李江勇 ^[1] 陈熙明 ^[2] 刘光琇 ^[2] 张威 ^[2] 陈拓 ^[3] 袁亚玲 ^[1] 李善家 ^[1] 学术成果认领

作者单位兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730050 ^[1] 中国科学院西北生态环境资源研究院沙漠与沙漠化重点实验室,甘肃兰州 730000;甘肃省极端环境微生物资源与工程重点实验室,甘肃兰州 730000 ^[2] 中国科学院西北生态环境资源研究院冰冻圈科学国家重点实验室,甘肃兰州 730000;甘肃省极端环境微生物资源与工程重点实验室,甘肃兰州 730000 ^[3]

关键词基因敲除无抗生素高效稳定核酸酶NucB gene knockout antibiotic-free efficient and stable NucB nuclease

分类号 Q812 Q815

栏目名称

基础研究

DOI 10.13885/j.issn.1000-2812.2024.02.003

发布时间 2024-05-06

基金项目

甘肃省科技重大专项资助项目（22ZD6WA035）