Epi-1对脂多糖诱导人牙髓干细胞炎症反应的影响
Effect of Epi-1 on inflammatory response of human dental pulp stem cells induced by lipopolysaccharide
摘要目的 研究生物活性肽Epi-1在脂多糖(LPS)诱导下的炎症微环境中对人牙髓干细胞(hDPSC)表达炎症因子的影响和可能机制.方法 通过组织块酶消化法分离、培养hDPSC,并通过流式细胞术鉴定.利用CCK-8试剂检测Epi-1对hDPSC细胞活性的影响,筛选出适宜的浓度.实验分为4组,分别为空白对照组(不含LPS和Epi-1)、LPS组(1.0 μg/mL LPS)、2.5 μg/mL Epi-1组(1.0 μg/mL LPS和2.5 μg/mL Epi-1)和5.0 μg/mL Epi-1组(1.0 μg/mL LPS和5.0 μg/mL Epi-1),通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测Epi-1对hDPSC白介素(IL)-6、IL-1β、IL-8基因表达的影响,进一步通过蛋白质免疫印迹法检测核因子κB信号通路关键蛋白p65、p-p65的表达情况,使用荧光探针检测活性氧生成情况.采用SPSS 22.0分析数据.结果 在2.5、5.0 μg/mL的质量浓度下,Epi-1无明显细胞毒性;Epi-1可显著降低LPS诱导后hDPSC中IL-6、IL-1β、IL-8的mRNA表达(P<0.01),减少p-p65的表达(P<0.05)和活性氧的生成(P<0.001).结论 Epi-1可能通过抑制核因子κB信号通路的激活和减轻氧化应激反应,从而降低LPS诱导的hDPSC的炎症反应.
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