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载姜黄素仿生微泡靶向清除巨噬细胞内活性氧的体外实验研究

In vitro experimental study on targeted scavenging effect of reactive oxygen species in macrophages by curcumin-loaded biomimetic microbubbles

摘要目的 制备巨噬细胞膜包覆的载姜黄素仿生微泡(C@MMBs),探讨其体外靶向能力及对巨噬细胞内活性氧(ROS)的清除效果.方法 采用差速离心法提取RAW264.7巨噬细胞膜,运用旋转蒸发结合机械振荡法制备载姜黄素脂质微泡(C@MBs),并通过超声辅助膜融合技术制备C@MMBs.通过光学显微镜观察其形态,马尔文粒径分析仪测定粒径及Zeta电位;采用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色检测C@MMBs膜蛋白保留情况,紫外分光光度法计算姜黄素包封率;采用CCK-8法评价生物相容性.将RAW264.7巨噬细胞分别与C@MMBs和C@MBs孵育4 h(C@MMBs组和C@MBs 组),流式细胞术检测细胞的平均荧光强度,评估细胞在体外对 C@MMBs 和 C@MBs 的摄取能力;另将RAW264.7巨噬细胞分别与C@MMBs、C@MBs、无血清培养基共孵育4 h,随后加入H?O?孵育2h以建立氧化应激模型,分别对应C@MMBs+H?O?组、C@MBs+H?O?组及H?O?组,采用DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内ROS水平,并对平均荧光强度进行定量分析.结果 成功制备结构稳定的C@MMBs,光学显微镜下其呈均匀分布的规则球形结构.C@MMBs粒径及Zeta电位分别为(946.30±38.50)nm、(-19.860±0.122)mV,较C@MBs[(882.50±14.44)nm、(-7.196±2.819)mV]略有变化;SDS-PAGE考马斯亮蓝染色证实其保留了巨噬细胞膜的主要蛋白成分,提示细胞膜成功包覆.紫外分光光度法显示,姜黄素包封率最高可达(81.07±0.66)%.CCK-8法结果显示,C@MMBs在140 μg/ml磷脂浓度以下对RAW264.7巨噬细胞增殖无抑制作用.流式细胞术检测显示,C@MMBs组巨噬细胞平均荧光强度显著高于C@MBs组(P<0.01),提示仿生修饰增强了微泡对巨噬细胞的同源靶向能力.在H?O?诱导的氧化应激模型中,C@MMBs+H?O?组平均荧光强度显著低于C@MBs+H?O?组(P<0.05),表明C@MMBs显著降低了细胞内ROS水平,抗氧化效果优于C@MBs.结论 本实验成功制备了C@MMBs,其在体外模型中表现出良好的稳定性和生物相容性,可增强巨噬细胞摄取能力和ROS清除效果.

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DOI 10.3969/j.issn.1008-6978.2026.05.002
发布时间 2026-06-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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