丝状肌动蛋白在噪声致耳蜗不同阶段凋亡坏死毛细胞中的变化

Changes of filamentous-actin at different stages of apoptotic and necrotic hair cells in rat cochleas induced by noise exposure

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摘要目的:通过观察丝状肌动蛋白(F-actin)在不同阶段凋亡、坏死毛细胞中的变化,揭示噪声性耳蜗毛细胞损伤早期的细胞形态学特征.方法:青年SD大鼠20只,接触噪声暴露的实验组及未接触噪声暴露的正常对照组动物各10只.将动物暴露于110 dB SPL,4 kHz窄带噪声,持续暴露8 h.稳态噪声暴露后接触155 dB SPL的脉冲噪声75次.噪声暴露前及噪声暴露后即刻、2周应用电反应测听仪检测不同频率短纯音(5、10和20 kHz)诱发的动物双侧听性脑干反应阈值(ABR).听觉功能检测后处死动物,解剖取双侧耳蜗.采用DNA荧光染料碘化丙锭(PI)标记毛细胞核,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽染色毛细胞纤毛、表皮板的丝状肌动蛋白.以对照组动物耳蜗为对照, 荧光显微镜下观察噪声暴露后大鼠耳蜗不同程度核固缩、核肿胀毛细胞的纤毛、表皮板F-actin表达的变化.结果:噪声暴露后即刻和2周不同频率短纯音诱发的ABR阈值均升高.荧光显微镜下观察发现,外毛细胞核肿胀时未见F-actin染色的改变;外毛细胞核型正常,但PI染色加深时,也未见F-actin的变化.外毛细胞核轻微固缩时,F-actin表达正常或轻度增强.外毛细胞核中度、重度毛细胞固缩时,F-actin染色变浅;外细胞核完全消失后,F-actin表达明显减弱或消失.结论:噪声暴露后耳蜗中凋亡、坏死的外毛细胞核变化早于纤毛及表皮板.F-actin可能在毛细胞凋亡中存在聚合和解聚2个过程,但其与毛细胞坏死过程无关.