miR-200b调控肌球蛋白轻链激酶/磷酸化肌球蛋白轻链信号通路对肠上皮紧密连接的影响
Effect of miR-200b on intestinal epithelial tight junction via MLCK/P-MLC signaling pathway
摘要目的:探究miR-200 b对肠上皮紧密连接的影响及作用机制。方法利用阴性对照慢病毒及表达miR-200 b的慢病毒感染Caco-2细胞形成NC株和200 b株,以10 ng/mL肿瘤坏死因子(TNF-α)处理建立体外肠上皮损伤模型,并分为NC组、NC+TNF-α组、200 b组和200 b+TNF-α组。测量4组细胞对肠上皮跨膜电阻抗(TEER)及对异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FITC-dextran)的通透性;Western blot检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及磷酸化肌球蛋白轻链(P-MLC)表达。结果与NC组相比,NC+TNF-α组TEER值降低、对FITC-dextran通透量显著增高、MLCK和P-MLC表达上调,差异均有统计学意义(P<?0.05)。与NC+TNF-α组相比,200b+TNF-α组TEER显著升高、FITC-dextran通透量显著降低、MLCK和P-MLC表达显著下调,差异均有统计学意义(P<?0.05)。结论 miR-200 b可调控MLCK/P-MLC信号通路修复TNF-α导致的肠上皮紧密连接损伤。
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