荧光定量PCR在石蜡标本中检测新型隐球菌的应用价值
The application value of fluorescence quantitative PCR in detecting Cryptococcus neoformans in paraffin-em-bedded specimens
摘要目的 探索实时荧光定量逆转录 PCR 法(Reverse-transcription quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)在石蜡包埋肺组织中检出新型隐球菌的应用价值.方法 采用传统染色方法(HE染色、六胺银染色、PAS染色)和RT-qPCR法对我院30例疑似新型隐球菌病病例进行检测,记录检测结果,用Kappa法进行一致性分析.结果 四种方法都可以检出新型隐球菌,RT-qPCR法敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和确诊率(96.2%/100.0%/100.0%/80.0%/96.7%)均高于传统染色方法,HE染色(34.6%/75.0%/90.0%/15.0%/40.0%)、六胺银染色法(88.4%/50.0%/92.0%/40.0%/83.3%)和 PAS 染色法(80.7%/50.0%/91.3%/28.6%/76.7%),且与临床最终确诊的结果一致性较好(Kappa=0.870),而传统染色方法Kappa值均小于0.4.结论 RT-qPCR法检测肺组织石蜡标本中新型隐球菌的敏感度高、特异度好,有望成为新型隐球菌快捷、稳定的检测手段之一.
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