换一批大鼠酒精性肝纤维化肝非实质细胞蛋白质组学研究
Proteome analysis of liver nonparenchymal cells from rats with alcoholic liver fibrosis
摘要目的：本文研究酒精对肝非实质细胞蛋白质表达的影响，以探讨酒精性肝纤维化的发病机制。方法大鼠酒精灌胃导致其发生肝纤维化。采用 James 染色法检测大鼠肝脏的病理学变化，通过 Percoll 密度梯度离心富集肝非实质细胞，再通过二维凝胶电泳（2DE）分离非实质细胞的蛋白质，经考马斯亮蓝（G250）染色，采用液相色谱串联质谱鉴定差异表达的蛋白质，并对部分差异蛋白质采用实时定量 RT -PCR 和免疫印迹的方法进行验证。对于2DE 胶上的蛋白质点，采用两样本 t 检验的方法，对于 RT -PCR分析，采用 Mann -Whitney U 检验进行统计分析。结果建立了酒精性肝纤维化大鼠模型，通过 Percoll 密度梯度离心纯化的非实质细胞中淋巴细胞、Kupffer 细胞和内皮细胞分别富集了1．5、3．2和3．7倍。采用二维凝胶电泳法检测到了800多个蛋白质点，检测到具有2倍以上的差异蛋白质有26个，采用 LC -MS 法鉴定了21个非冗余蛋白质，对其中7个蛋白质的 RT -PCR 分析发现：ANXA3、CES3、ATPA 和 NDUFV2的 mRNA 水平和蛋白质组研究结果一致。结论本研究鉴定了一批与酒精性肝纤维化相关的蛋白质，可能为了解酒精性肝纤维化发病机制提供一些新线索。
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分类号
R575.2（消化系及腹部疾病）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-5256.2014.10.020
发布时间
2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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