换一批血管内皮间质样转分化遗传示踪小鼠模型的构建及其在肝纤维化研究中的应用
Establishment of a mouse model of vascular endothelial-mesenchymal transdifferentiation genetic tracing and its role in liver fibrosis studies
摘要目的 构建Cdh5-CreERT/Acta2-tdTomato-STOPfloxed-eGFP knockin遗传示踪小鼠,并探究其在肝纤维化血管内皮细胞转化研究中的应用.方法 将Cdh5-CreERT小鼠和Acta2-KI小鼠进行交配繁育,经PCR基因型鉴定得到Cdh5-CreERT/Acta2-KI遗传示踪小鼠.通过分离、培养原代肝血窦内皮细胞(LSEC)和建立CCl4肝纤维化模型,取LSEC和肝脏组织,分别进行免疫荧光染色,观察荧光蛋白tdTomato和eGFP的表达.结果 经他莫昔芬诱导后,Cdh5-CreERT/Acta2-KI遗传示踪小鼠的LSEC和肝脏组织在体内外建立的内皮-间质样转分化条件下可表达eGFP,而未经诱导的对照组只表达tdTomato.结论 成功构建的Cdh5-CreERT/Acta2-KI遗传示踪小鼠可实现对血管内皮-间质样转分化的有效标记,并为肝纤维化中肌纤维母细胞来源的多样性提供新的遗传示踪学依据.
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