摘要目的 探讨柴胡疏肝散加减方对胆囊胆固醇结石(CS)肝郁证胆囊异常舒张的作用机制,进而为临床用药提供依据.方法 采用"高脂致石饲料+慢性不可预知轻度应激(CUMS)"建立CS肝郁证小鼠模型.将45只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组(6只,普通饲料)和CS造模组(39只,高脂致石饲料).CS成模后,将CS造模组再次随机分为CS组、CS肝郁组、中药组(柴胡疏肝散加减方)和西药组(熊去氧胆酸),每组各9只;继续高脂致石饲料喂养,除CS组外,其余3组进行21天的CUMS造模,干预结束后取材.检测血清胆囊收缩素(CCK)、肝功能、血脂相关指标;肝、胆囊组织行苏木精-伊红染色;RT-qPCR与Western Blot分别检测肠道G蛋白偶联胆汁酸受体1(TGR5)、胰高血糖素样肽-1/2(GLP-1/2)和胆囊TGR5、胰高血糖素样肽-2受体(GLP-2R)的mRNA及蛋白表达;代谢组学检测肠内容物胆汁酸组成.计量资料两组间比较采用成组t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t法或Games-Howell法.结果 与空白组相比,CS组出现明显胆囊结石、胆汁浑浊,肝脂肪变性及胆囊壁结构异常,行为学结果表明焦虑与抑郁样行为增加;胆汁总胆固醇、血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶及低密度脂蛋白水平显著升高,胆汁总胆汁酸(TBA)、血清CCK及高密度脂蛋白(HDL)水平显著降低(P值均<0.05);肠GLP-1/2、TGR5 mRNA表达均显著升高,胆GLP-2R、TGR5的蛋白表达显著升高,mRNA表达显著降低(P值均<0.05);肠内容物多种胆汁酸成分显著改变(P值均<0.05).与CS组相比,CS肝郁组病理及行为学表现进一步加重,胆汁酸成分改变,肠TGR5、GLP-1/2及胆TGR5、GLP-2R的蛋白和mRNA表达均升高(P值均<0.01).与CS肝郁组相比,两用药组均能改善胆囊形态,减轻结石及肝损伤,恢复肝功能及血脂水平;并且均可显著降低肠TGR5、GLP-1/2及胆TGR5、GLP-2R的蛋白和mRNA表达(P值均<0.05);甘氨脱氧胆酸、牛磺α-鼠胆酸与牛磺鹅脱氧胆酸在中药组显著上调(P值均<0.05),西药组则见牛磺猪脱氧胆酸、牛磺α-鼠胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸和甘氨熊脱氧胆酸显著上调(P值均<0.05).与西药组相比,中药组行为学改善更明显,胆汁TBA和血清HDL更高(P值均<0.01),肠TGR5、GLP-1/2及胆TGR5、GLP-2R的蛋白表达降低,肠TGR5的mRNA表达降低(P值均<0.01),牛磺熊脱氧胆酸上调,而甘氨熊脱氧胆酸、牛磺猪脱氧胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸和牛磺石胆酸显著下调(P值均<0.05).结论 柴胡疏肝散加减方可通过调控胆汁酸-TGR5轴改善CS肝郁证肝功能及胆囊异常舒张,发挥疏肝解郁、行气利胆的治疗作用.