缺氧诱导因子-1α调控骨形态发生蛋白9对间充质干细胞成骨分化的影响

Effect of hypoxia inducible factor-1α regulating bone morphogenetic protein 9 on osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells

二维码有效期 120s

摘要目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对骨形态发生蛋白 9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)C3H10T1/2 成骨分化的影响.方法体外培养小鼠MSCs C3H10T1/2 细胞系,分为 5 组:NC组(正常培养C3H10T1/2 细胞)、Ad-GFP组(转染腺病毒液)、Ad-BMP9 组(转染BMP9 过表达的腺病毒液)、pcDNA3.1-mR-FP组(转染Ad-BMP9 +pcDNA3.1 空载质粒)、pcDNA3.1-HIF-1α组(转染Ad-BMP9 + HIF-1α过表达质粒).采用碱性磷酸酶(ALP)显色及活性检测试剂盒检测各组C3H10T1/2 细胞中ALP活性;采用茜素红S染色检测各组 C3H10T1/2 细胞钙盐沉积情况,并用吸光度(A)值进行定量分析;采用免疫印迹法检测各组C3H10T1/2 细胞中BMP9、HIF-1α及成骨分化标志物骨钙素(OC)、骨桥蛋白(OPN)及Runt相关转录因子 2(Runx2)蛋白表达.结果与NC组、Ad-GFP组比较,Ad-BMP9 组ALP活性、钙盐沉积、A值及BMP9、HIF-1α、OC、OPN、Runx2 蛋白表达增加(P<0.05).与Ad-BMP9 组、pcDNA3.1-mRFP组比较,pcDNA3.1-HIF-1α组ALP活性、钙盐沉积、A值及BMP9、HIF-1α、OC、OPN、Runx2 蛋白表达增加(P<0.05).结论 HIF-1α可促进BMP9 诱导MSCs C3H10T1/2 成骨分化,可能与上调OC、OPN及其下游Runx2 蛋白表达有关.