结核分枝杆菌临床分离株利福平耐药表型及rpoB基因型分析

Analysis of rifampin-resistant phenotype and rpoB genetype in clinical Mycobacterium tuberculosis isolates

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摘要目的分析结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株利福平(rifampin,RFP)耐药表型及rpoB基因突变关系,阐明MTB RFP耐药株rpoB基因突变特征.方法采用改良罗氏培养基比例法检测387株MTB临床分离株对RFP敏感性,并进行rpoB基因测序.对经测序rpoB基因511位和533位密码子突变株进行RFP最小抑菌浓度(MIC)检测.结果比例法检测387株 MTB 临床分离株中,198株RFP耐药株,189株RFP敏感株.rpoB基因测序结果表明,198株比例法RFP耐药株中,192株(96.97%)发生rpoB基因突变,涉及16种单位点和24种双位点密码子联合突变类型,单位点和双位点密码子联合突变率分别为84.34%(167/198)和12.63%(25/198),其中发现1种单位点和21种双位点密码子联合突变新类型.最常见的突变位点为531位(51.01%)、526位(21.21%)和516位(7.07%)密码子.6株(3.03%)耐药株在rpoB测序范围内未见突变.189株比例法RFP敏感株中,174株(92.06%)在rpoB基因测序范围内未见突变,15株(7.94%)发生突变,其中7株CTG511CCG(Leu→Pro)突变和6株CTG533CCG(Leu→Pro)突变.511位和533位密码子突变株MIC检测结果提示其突变与低度耐RFP相关.结论所得数据及一些新的发现为进一步研究MTB RFP耐药机制、研制快速新型分子药敏试验方法提供理论和实际应用依据.