换一批血管新生抑制因子软骨调节素I前体蛋白的剪切加工研究
The research on processing of anti-angiogenesis factor-Chondromoduin-I precursor
摘要目的研究参与血管新生抑制因子软骨调节素I（ ChM-I）前体加工的前蛋白转化酶（ PCs）的种类及其作用，探讨ChM-I蛋白的翻译后加工成熟机制。方法构建ChM-I前体蛋白真核表达质粒并转染多种细胞，Western Blot检测细胞裂解液和培养基上清中ChM-I的表达变化；将ChM-I前体蛋白表达质粒与5种不同前蛋白转化酶表达质粒在ChM-I前体加工缺陷型细胞COS7中共表达，Western Blot检测细胞裂解液和培养上清中ChM-I蛋白的表达。结果 ChM-I前体荧光表达质粒构建成功，可在多种细胞系中表达ChM-I前体蛋白；ChM-I前体蛋白在COS7细胞中无法被有效地剪切加工成成熟ChM-I蛋白，可作为ChM-I加工缺陷型细胞使用；除PACE4以外，Furin、ΔFurin、PC5A和PC7均能显著提高培养液上清中ChM-I的含量，并缓解过量表达的ChM-I前体在细胞中的堆积。结论 PCs中的Furin、PC5A和PC7能将过表达的ChM-I前体酶切加工为成熟ChM-I，提示Furin、PC5A和PC7可能在ChM-I蛋白剪切加工成熟过程中发挥重要作用。
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DOI
10.3969/j.issn.1671-4695.2014.16.002
发布时间
2014-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划（(973计划，2012CB526600)）
北京市科委课题（(Z121100007512011)）
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