肠杆菌科细菌对阿米卡星双圈耐药机制探讨

Investigation on the mechanism of double zone drug resistance of Enterobacteriaceae to amikacin

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摘要目的探讨肠杆菌科细菌K-B法检测结果对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的相关机制.方法收集K-B法对AMK呈双圈耐药的临床分离大肠埃希菌(E.coli)5株和肺炎克雷伯菌(Kpn)2株作为实验菌株,同期分离对AMK完全耐药的E coli和Kpn各2株作为对照菌株；分别采用Vitek 2 Compact药敏卡和琼脂稀释法复核菌株对AMK的药物敏感性；用PCR及DNA测序检测氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及16S rRNA甲基化酶相关基因；用基因外重复回文序列(REP)-PCR法分析菌株的同源性.结果 Vitek 2 Compact药敏卡结果显示,7株实验菌中3株对AMK为敏感,4株为中介；对照菌株均对AMK耐药.琼脂稀释法结果显示所测菌株均对AMK耐药,MIC均＞512 mg/L.所测菌株携带不同的氨基糖苷类修饰酶基因,主要为aac(6)-Ⅰ基因；整合子可变区携带基因盒为aadA5-dfrA17的菌株8株,为aadA2-dfrA12的菌株3株.双圈耐药表型菌株均扩增出armA基因,而对照菌株未扩增出该基因.REP-PCR结果显示双圈耐药菌株同源性较高,与同期分离的对照菌株差异较大.结论 AMK双圈耐药表型的出现与16S rRNA甲基化酶armA基因的表达相关；Vitek 2 Compact药敏系统对K-B法中对AMK呈双圈耐药的肠杆菌科细菌药敏结果可能发生偏差.