用免疫磁珠法检测抗白念珠菌烯醇化酶抗体
Establishment of an immunomagnetic bead assay for the detection of IgG antibody to Candida albicans enolase
摘要目的 建立检测人血清抗白念珠菌烯醇化酶(Eno) IgG类抗体的免疫磁珠法,并评估其在念珠菌血症诊断中的价值.方法 将Eno重组蛋白耦联至磁性微珠上,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgG为二抗,优化免疫磁珠法的反应条件,考察其精密度和特异性.收集经血培养确诊的念珠菌血症患者(n=113)、念珠菌定植者(n=50)、细菌菌血症患者(n=30)和健康人对照者(n=100)血清,用免疫磁珠法测定抗Eno抗体,并与ELISA法结果进行比较.结果 免疫磁珠法测定抗Eno抗体的批内、批间变异系数(CV)分别为8.2%和14.2%,重组Eno抗原对相应抗体的阻断率为91.6%.以吸光度(A)值0.29为cut off值时,诊断念珠菌血症的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为80.5%、92.3%、90.1%和84.5%.免疫磁珠法的敏感性和特异性与ELISA法比较无统计学差异,但检测流程从37℃2.5h缩短至常温1h.结论 免疫磁珠法检测抗Eno IgG类抗体简便、快捷、可靠,在侵袭性念珠菌感染研究中具有潜在的应用价值.
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