血清抗烟曲霉二肽基肽酶V肽段IgG类抗体ELISA法的建立及初步应用
Establishment and preliminary application of an ELISA method for detecting serum IgG antibody against Aspergillus fumigatus dipeptidyl peptidase V fragment
摘要目的 建立检测人血清中抗烟曲霉二肽基肽酶V(dipeptidyl peptidases V,DPPV)肽段IgG类抗体(抗DPPV)的ELISA法,评估其对侵袭性曲霉病(IA)的早期诊断价值.方法 用重组烟曲霉DPPV肽段作为包被抗原,建立检测血清中抗DPPV的ELISA法,检测105例IA患者、200例非IA患者及200例健康人血清中抗DPPV水平,确定cut off值,考查方法的精密度和特异性.部分IA患者抗DPPV结果与抗烟曲霉硫氧还蛋白还原酶(TR)抗体(抗TR)检测和曲霉半乳甘露聚糖(GM)检测结果对比,评价其临床应用价值.结果 以建立的ELISA法检测吸光度(A)值为6.688、0.709的2份抗DPPV抗体阳性血清,批内变异系数(CV)为4.1%和8.0%,批间CV为7.1%和10.7%.重组抗原对血清中相应抗体的阻断率>90%.以A值0.542为cut off值,对IA诊断的敏感性为66.7%,特异性为90.7%.非中性粒细胞缺乏的IA患者抗DPPV阳性率(75.3%,55/73)高于中性粒细胞缺乏的IA患者(46.9%,15/32),差异有统计学意义(x2=8.11,P<0.05);92例IA患者血清抗DPPV、抗TR和GM测定总阳性率分别为63.0%、60.9%和73.9%,差异无统计学意义(P>0.05);中性粒细胞缺乏的IA患者GM阳性率(89.7%)显著高于抗DPPV、抗TR的阳性率(41.4%和34.5%)X2分别为14.96、18.75,P均<0.01.抗DPPV与抗TR联合检测阳性率达到82.6%,抗DPPV、抗TR和GM试验三者联合检测的阳性率可提高到96.7%.结论 检测抗DPPV抗体的ELISA法精密度和特异性较好,对侵袭性曲霉感染具有潜在的辅助诊断价值,联合多个指标检测可提高诊断的敏感性.
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