纳米金标记银染增强法快速检测痰液结核分枝杆菌
Nanogold labeling with silver staining-enhanced method for rapid detection of Mycobacterium tuberculosis in sputum samples
摘要目的 建立快速检测结核分枝杆菌(MTB)的纳米金标记银染增强法(金标记银染法).方法 以MTB的IS6110基因为靶基因,分别与互补的纳米金探针、生物素探针杂交,形成三明治杂交结构,然后借链霉亲合素将靶序列锚定在酶标孔内,通过纳米金催化的银染放大效应产生高灵敏的识别信号,在酶联仪上检测其吸光度(A)值.用本法、传统固体培养法、PCR法检测90例可疑患者痰标本并进行比对.结果 金标记银染法检测限达1 pmol/L,90例临床标本的MTB检出率与PCR法均为42.2% (38/90);培养法MTB检出率为36.7% (33/90),金标记银染法与其检测结果差异无统计学意义(P>0.05).结论 成功构建了金标记银染法,可直接应用于临床疑似肺结核患者痰标本的快速检测,具有简便快速、灵敏度高、特异性强等优点.
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