亚硝酸盐对焦酚红法检测24h尿液总蛋白的干扰分析
Analysis of interference effect of nitrites on total urinary protein assay by pyrogallol red molybdenum method
摘要目的 探讨亚硝酸盐对于焦酚红法检测24 h尿液总蛋白的干扰效应,并评估维生素C纠正干扰的可行性.方法 根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP7-A3文件,选取24 h尿液总蛋白定量结果为150 mg/L、500 mg/L和1 000 mg/L的新鲜尿液标本作为对照样本,并配制含不同浓度亚硝酸钠的干扰物样本.利用配对差异实验确认亚硝酸盐的干扰作用,并通过剂量效应实验明确亚硝酸盐浓度与干扰程度的关系.在终浓度为200 μg/mL亚硝酸钠存在的情况下,评估不同浓度维生素C纠正干扰的效果.同时收集61例亚硝酸盐阳性和40例亚硝酸盐阴性的临床标本,比较两组标本维生素C纠正前后的相对差值,评估其临床应用价值.结果 配对差异实验中200 μg/mL亚硝酸钠对150 mg/L和500 mg/L两个浓度的尿总蛋白测定分别存在-157.8%和-36.2%的相对干扰,显著大于1/2TEa(22%),而对于高浓度1 000 mg/L的尿总蛋白虽存在-20.5%的负干扰,但在可接受范围内.剂量效应实验结果显示随着尿液中亚硝酸盐浓度的增加,尿总蛋白检测所受负干扰作用亦逐渐增大.在终浓度为200 μg/mL亚硝酸钠存在的情况下,添加0.2 mg/mL的维生素C可分别将150 mg/L和500 mg/L的尿总蛋白纠正至148 mg/L(-1.1%)和402 mg/L(-19.5%),均处于可接受范围内.临床标本中亚硝酸盐阳性组通过维生素C纠正产生的相对差值显著高于亚硝酸盐阴性组(P<0.01).结论 亚硝酸盐对于焦酚红法检测尿液总蛋白存在负干扰,尤其是在尿总蛋白150 mg/L情况下,需引起临床实验室的关注.添加0.2 mg/mL维生素C可有效纠正低浓度尿总蛋白标本中亚硝酸盐的干扰作用,具有一定的临床应用价值.
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