摘要目的 分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药特征、分子分型及生物学特性.方法 回顾性分析南通市第三人民医院2019年4月至2021年5月临床收集的非重复31株CRKP菌,用Vitek 2 Compact微生物分析系统进行细菌鉴定及体外药敏分析;通过肉汤稀释法测定多黏菌素B的最低抑菌浓度(MIC),并用纸片扩散法补充测定厄他培南、头孢噻肟、头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、替加环素的药物敏感性;通过改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和乙二胺四乙酸改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)联合实验初步测定耐药表型;PCR扩增部分碳青霉烯耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48)、部分AmpC酶基因(blaDHA、blaACC、blaCIT、blaEBC、blaMOX和 blaFOX)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因(blaSHM、blaTEM和blaCTX-M)以及 9 种毒力基因,并送测序确认;拉丝试验用于筛选高黏液表型菌株;对31株菌进行体外生长曲线分析、生物膜形成试验及多位点序列分型(MLST);提取细菌外膜蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,检测外膜蛋白OmpK35和OmpK36的表达情况.结果 31株菌对氨苄西林/舒巴坦、氨苄西林、氨曲南、头孢唑林、头孢曲松、头孢噻肟、头孢呋辛、环丙沙星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南和厄他培南的耐药率均为100％,对多黏菌素B的耐药率为32.26％,而对替加环素100％敏感.ST分型共有3种类型,以ST15型为主,占61.29％(19/31).所有菌株均产生丝氨酸碳青霉烯酶,碳青霉烯类耐药基因中仅检测到blaKPC-2.毒力基因中fimH和entB检出率为100％(31/31),mrkD检出率为80.64％(25/31),部分菌株携带rmpA、rmpA2等毒力基因,magA 基因未检出,ST11菌株中rmpA2、iutA和mrkD的携带率高于ST15菌株.拉丝试验阳性率为38.71％.所有菌株在体外生长曲线无差异,且均能形成不同程度的生物膜.所有ST11型菌株均出现不同程度的OmpK36蛋白变异,而31株菌株的OmpK35蛋白均正常.结论 该院CRKP菌株耐药率高,序列分型以ST15型为主,均携带blaKPC-2基因和毒力基因.应加强流行菌株的分子分型检测和感染防控措施.