基于过柱法核酸提取的离心式微流控技术在常见生殖道感染病原体检测中的应用
Application of centrifugal microfluidic technology based on extraction of column for detection of common reproductive tract infections
摘要目的 建立一种基于过柱法核酸提取的离心式微流控技术用于常见生殖道感染病原体检测的方法.方法 设计特异性引物探针,并将过柱法核酸提取+qPCR 扩增检测整合于一张离心式微流控芯片上,实现对 9 种常见生殖道病原体(人型支原体、单纯疱疹病毒Ⅱ型、沙眼衣原体、解脲脲原体、阴道毛滴虫、淋病奈瑟菌、单纯疱疹病毒Ⅰ型、生殖道支原体、苍白螺旋体)的全自动检测,评价该方法的最低检出限、特异性、重复性和线性关系;检测 255 例阳性和 45 例阴性临床标本,验证准确性.结果 离心式微流控芯片法的总体最低检出限为 500 copies/mL;与常见生殖道病原体无交叉反应;精密度总CV均<5%;具有良好的线性关系(R2 均>0.99).与常规方法比较,离心式微流控芯片法的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率均高于 96.2%,两种检测方法在常见 9 种生殖道病原体的差异无统计学意义(P均>0.05),具有极好的一致性(Kappa值均>0.96).结论 基于过柱法核酸提取的离心式微流控技术在检测常见生殖道感染病原体中表现出优异的灵敏度、重复性、特异性和准确性,具有重要的临床应用潜力.
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