换一批人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因的克隆、原核表达和纯化
Cloning,expression and purification of L type calcium channel α1D subunit specific gene of human odontoblast
摘要目的:获得原核表达的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白.方法:采用RT-PCR技术从人成牙本质样细胞系中获得cDNA,亚克隆至PUC18载体中,经测序确认后,将该基因插入原核表达载体pProEXHTb中,通过电穿孔技术转化E.coli表达菌DH5α,以IPTG诱导蛋白表达,并经Ni-NTA 亲和柱层析纯化,SDS-PAGE鉴定.结果:获得的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性cDNA序列与GenBank登录的cDNA序列一致.结论:成功克隆人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因,建立了原核表达、纯化体系,制备了纯化的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白.
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DOI
10.3969/j.issn.1003-1634.2006.06.005
发布时间
2006-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30471889）
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