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不同细胞外基质对人胚胎干细胞体外定向诱导分化为角化细胞的影响

Influence of different extracellular matrix to induced differentiation of Human Embryonic Stem Cells to Ker-atinocytes in vitro

摘要目的:探讨不同细胞外基质对胚胎干细胞源性角化细胞生长、增殖及分化的影响。方法:体外培养的人类胚胎干细胞经RA、BMP4、AA诱导后,分别接种到以Matrigel(A组)、Ⅰ型胶原(B组)、Ⅳ型胶原(C组)、明胶(D组)包被的培养皿中培养,E组为无包被培养皿作为空白对照组。通过倒置显微镜观察细胞生长情况;用CCK8法检测细胞的增殖能力;并通过Western Blot检测CK14表达量,测定各组灰度值。结果:A组生长的E-KCs细胞最快到达生长对数期,增殖能力最强,且细胞集落形成率最高,与其他组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);A组与正常口腔黏膜组(阳性对照)CK14表达量条带灰度值差异无统计学意义,但与B、C、D组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:Matrigel与其他3种细胞外基质相比能显著提高人类胚胎干细胞向角化细胞诱导分化的能力,并能促进E-KCs生长和增殖。

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