山柰酚对炎症状态下人根尖乳头干细胞成骨/成牙本质向分化的影响及相关机制研究
The effect of kaempferol on the osteogenic/dentinogenic differentiation of stem cells from the human apical pa-pilla under inflammation and its related mechanism
摘要目的:研究山柰酚对炎症状态下人根尖乳头干细胞(stem cells from the apical papilla,SCAP)的成骨/成牙本质向分化的影响及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用.方法:采用酶消化法结合组织块法获得SCAP,流式细胞术检测细胞表面标志物.成骨诱导 2 周后,设空白对照组,TNF-α组,TNF-α+XAV939组,TNF-α+山柰酚组,TNF-α+山柰酚组+XAV939 组进行ALP的活性水平测定,茜素红染色及荧光定量检测,Western blot分析检测通路相关蛋白表达情况.结果:与TNF-α组相比较,TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚组ALP活性显著提高,而TNF-α+XAV939 组降低(P<0.05).与TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚组比较,TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚+XAV939 组ALP 活性表达抑制(P<0.05).未加入山柰酚的TNF-α+XAV939 组较TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚+XAV939 组,茜素红染色明显变浅,矿化结节形成的数量小且稀疏.与TNF-α组相比较,TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚组DSPP、OPN、RUNX2、OCN表达水平均显著提高,而TNF-α+XAV939 组均降低(P<0.05);与TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚组比较,TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚+XAV939 组DSPP、OPN、RUNX2、OCN表达水平均降低(P<0.05).TNF-α组成骨相关蛋白和通路相关蛋白β-cate-nin、p-GSK3β的表达水平均高于 TNF-α+XAV939 组(P<0.05);与 TNF-α+0.1 μmol/L 山柰酚组比较,TNF-α+0.1 μmol/L山柰酚+XAV939 组β-catenin、p-GSK3β的表达水平均降低(P<0.05);GSK3β表达水平无明显差异.结论:浓度 0.1 μmol/L山柰酚能促进炎症状态下SCAP成骨/成牙本质向分化的潜能,Wnt/β-catenin信号通路在此过程中发挥重要作用.
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