基于SDF-1/CXCR4通路探讨牵张力对牙周膜成纤维细胞成骨分化的影响
Exploring the effect of stretch force on osteogenic differentiation of periodontal ligament fibroblasts based on SDF-1/CXCR4 pathway
摘要目的:探讨牵张力(Stretch)对牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLFs)成骨分化的影响及作用机制研究.方法:体外培养hPDLFs并将其分为对照组(Control组)、牵张力干预6 h组(Stretch 6 h组)、牵张力干预 12 h组(Stretch 12 h 组)、SDF-1/CXCR4 通路激活剂组(CTCE-0214 组)、牵张力干预 12 h+SDF-1/CXCR4通路抑制剂组(Stretch 12 h+AMD3100组).使用FlexCell系统对hPDLFs施加周期性牵张力.比色法和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法检测hPDLFs ALP活性;茜素红染色观察钙化结节情况;RT-qPCR法检测与成骨相关基因表达水平;免疫组化法检测BSP、COL1A1阳性表达;Western blot检测SDF-1/CXCR4通路蛋白表达.结果:与Control 组比较,Stretch 6 h 组、Stretch 12 h 组及 CTCE-0214 组 hPDLFs ALP 活性增强、钙化结节增多,RUNX2、OPN 和OCN mRNA相对表达水平提高,BSP、COL1A1阳性表达及SDF-1/CXCR4通路蛋白表达量增加,且Stretch 12 h组hPDLFs 的成骨分化能力高于 Stretch 6 h 组(P<0.05);与 Stretch 12 h 组比较,Stretch 12 h+AMD3100 组 hPDLFs ALP活性下降、钙化结节减少,RUNX2、OPN和OCN mRNA相对表达水平降低,BSP、COL1A1阳性表达及SDF-1/CXCR4通路蛋白表达量减少(P<0.05).结论:施加周期性牵张力可通过激活SDF-1/CXCR4通路促进hPDLFs的成骨分化、加快正畸进展.
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