miR-134在氧-糖缺失神经元损伤中的作用
The role of miR-134 in oxygen-glucose deprivation-induced neural cell ischemic injury and its mechanism
摘要目的 探讨miR-134在乳鼠脑皮层神经元氧-糖缺失(oxygen glucosedeprivation,OGD)致缺血损伤中的作用及其可能分子机制.方法 离体培养乳鼠脑皮层神经元10 d后,随机分为五组,正常组和OGD组,后者包括非转染组、miR对照组、miR-134抑制剂组、miR-134前体组.按照分组加入饲养液中感染24 h换液,72 h后对OGD组进行OGD处理.利用噻唑蓝(MTT)法检测神经元生存率,Western blotting检测热休克蛋白A12B(HSPA12B)表达水平,实时定量RT-PCR方法检测miR-134和HSPA12B mRNA表达水平以及通过双荧光素酶报告基因技术验证miR-134对HSPA12B mRNA 3'UTR的直接调控作用.结果 与非转染组比较,在OGD致神经元缺血损伤中miR-134前体组,miR-134的表达水平明显提高,细胞存活率明显降低,HSPA12B蛋白水平明显降低,荧光素酶活性也明显降低(P<0.05);而miR-134抑制剂组miR-134的表达水平明显降低,细胞存活率显著提高,HSPA12B蛋白水平明显提高,荧光素酶活性也明显升高(P<0.05);但各组之间HSPA12B mRNA水平差异无统计学意义.结论 miR-134通过负性调控HSPA12B蛋白表达水平,在CGD所致神经元缺血损伤中发挥重要作用,在mRNA水平上为治疗缺血性脑卒中提供了可能的分子靶标.
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