七氟醚预处理对缺氧诱导因子1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响

Neuroprotection of sevoflurane preconditioning induced by Slit2/Robo1 signal path activation through HIE-1α

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摘要目的评价七氟醚预处理对原代大鼠皮质神经元氧糖剥夺-复糖复氧后缺氧诱导因子(HIF)1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响.方法出生24 h内的SD大鼠体外提取原代皮质神经元,以1×106/ml的密度接种于6孔板(2ml/孔)培养皿,采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)神经元正常培养;氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)神经元行氧糖剥夺90 min;七氟醚预处理组(S组)在行氧糖剥夺前预先给予2％七氟醚处理1h,余同O组;HIF-1α抑制组(H组)在七氟醚预处理前行2ME(5 μM/L)处理72 h,余同S组.复糖复氧24 h后收集神经元,采用Hoechst/PI双染色法测定神经元凋亡率;采用RT-PCR法测定HIF-1α、Slit2和Robo1 mRNA的表达量;采用Western blot法测定HIF-1α、Slit2和Robo1蛋白的表达量.结果与C组比较,O组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1α mRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1 mRNA和蛋白表达量明显上调(P＜0.05);与O组比较,S组神经元PI阳性率明显下降,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P＜0.05);与S组比较,H组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显下调,Slit2和Robo1 mRNA和蛋白表达量明显下调(P＜0.05).结论七氟醚预处理通过HIF-1α增加Slit2/Robol信号通路的表达,抑制原代大鼠皮质神经元在氧糖剥夺-复糖复氧后的凋亡.