右美托咪定对人结肠癌细胞增殖和自噬的影响
Effects of dexmedetomidine on proliferation and autophagy of human colon cancer cells
摘要目的 探讨右美托咪定对人结肠癌细胞增殖和自噬的影响.方法 实验一中,选择处于对数生长期的人结肠癌细胞LoVo和HCT116,将细胞分为八组:LoVo-1组(L0-1组)、LoVo+右美托咪定1 nmol/L-1组(L1-1组)、LoVo+右美托咪定10 nmol/L-1组(L10-1组)、LoVo+右美托咪定100 nmol/L-1 组(L100-1 组)、HCT116-1 组(H0-1 组)、HCT116+右美托咪定 1 nmol/L-1 组(H1-1 组)、HCT116+右美托咪定 10 nmol/L-1 组(H10-1 组)和 HCT116+右美托咪定 100 nmol/L-1 组(H100-1组).细胞加药处理24、48 h时采用CCK-8法检测细胞增殖率,细胞加药处理24 h时收集细胞,采用Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、自噬相关蛋白Beclin-1含量.实验二中,选择处于对数生长期的人结肠癌细胞LoVo和HCT116,将细胞分为四组:LoVo-2组(L0-2组)、LoVo+右美托咪定 10 nmol/L-2 组(L10-2 组)、HCT 116-2 组(H0-2 组)和 HCT116+右美托咪定 10 nmol/L-2 组(H10-2组).细胞加药处理24 h时,收集细胞,采用免疫荧光法观察LC3蛋白表达情况并计算LC3位点阳性率;细胞加药处理24h时,收集细胞,采用透射电镜观察自噬体.结果 实验一中,与L0-1组和L1-1组比较,L10-1组和L100-1组细胞加药处理后24、48 h细胞增殖率明显降低,细胞加药处理后24 h LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白含量明显升高(P<0.05).与H0-1组和H1-1组比较,H10-1组和H100-1组细胞加药处理后24、48 h细胞增殖率明显降低,细胞加药处理后24 h LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白含量明显升高(P<0.05).实验二中,与L0-2组比较,细胞加药处理后24 h L10-2组LC3位点阳性率明显升高(P<0.05).与H0-2组比较,细胞加药处理后24 h H10-2组LC3位点阳性率明显升高(P<0.05).L0-2组和H0-2组细胞膜完整,细胞核清晰.L10-2和H10-2组细胞膜破坏,细胞器排列紊乱,可见大量自噬小体及自噬溶酶体.结论 右美托咪定可能通过诱导自噬,抑制结肠癌细胞的增殖.
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